A simple and cost-effective method for DNA extraction suitable for PCR in “sucupira branca”

Jaílson  do Nascimento Silva; João Paulo  Gomes Viana; Marcones Ferreira  Costa; Gisele Holanda de  Sá; Maria Fernanda da Costa  Gomes; Lidiane de Lima  Feitoza; Sérgio Emílio dos Santos  Valente

doi:10.14393/BJ-v37n0a2021-54133

Autores

Jaílson do Nascimento Silva Universidade Federal do Piauí https://orcid.org/0000-0002-6083-5320
João Paulo Gomes Viana University of Illinois https://orcid.org/0000-0002-9217-9604
Marcones Ferreira Costa Universidade Federal do Piauí https://orcid.org/0000-0003-2953-7330
Gisele Holanda de Sá Universidade Federal do Piauí
Maria Fernanda da Costa Gomes Universidade Federal do Piauí
Lidiane de Lima Feitoza Universidade Federal do Piauí
Sérgio Emílio dos Santos Valente Universidade Federal do Piauí

DOI:

https://doi.org/10.14393/BJ-v37n0a2021-54133

Palavras-chave:

Conservation, DNA Isolation, Extraction, ISSR.

Resumo

Sucupira branca é encontrada no cerrado brasileiro e é uma planta bem adaptada à solos de baixa fertilidade e o extrato de seus frutos possui atividades antiinflamatória, antiulcerogênica, antimicrobiana, cercaricida, leishmanicida e antioxidante. Além disso, fornece proteção conta estresse oxidativo, é um agente natural de biocontrole do Aedes aegypti, possui madeira muito resistente, é uma planta melífora e tem sido usada em programas de reflorestamento. O desenvolvimento de estratégias de conservação é importante para manter a diversidade em populações naturais de sucupira branca já que estas populações estão sofrendo erosão genética. Técnicas de biologia molecular requerem DNA genômico de alta qualidade e são importantes para caracterizar a diversidade genética de plantas e no desenvolvimento de estratégias de conservação. Este trabalho objetivou comparar cinco métodos de extração de DNA em sucupira branca. A qualidade e concentração do DNA foi revelada por eletroforese em gel de agarose e apenas os protocolos de Dellaporta, Wood and Hicks (1983) e Khanuja et al. (1999) não resultaram em quantidades satisfatórias de DNA. Quando realizou-se a PCR com três primers ISSR, o DNA foi amplificado com sucesso a partir do DNA extraído de acordo com os protocolos propostos por Doyle e Doyle (1987), Ferreira e Grattapaglia (1995) e Romano e Brasileiro (1998), que são menos caros quando comparados a kits comerciais de extração de DNA; fornecendo um DNA de qualidade e em quantidade suficiente para a realização de reações de amplificação de DNA por meio da PCR.

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