Avaliação de IL-10 e TGF- β 1 sob condições de hipóxia em cultivo celular 3D de células-tronco mesenquimais de tecido-adiposo humano

Resumo

Células-tronco mesenquimais (CTMs) são células multipontes derivadas da camada mesoderma e que possuem potenciais de auto-renovação e diferenciação celular. Estas células podem ser extraídas de diversos tecidos, sendo as principais fontes a medula óssea (MO) e o tecido adiposo (TA). Assim, CTM-TA são potencialmente capazes de se diferenciarem em diversos tipos celulares como adipócitos, neurônios e osteoblastos através de ações parácrinas do microambiente de cultivo. Este trabalho teve como objetivo dosar os níveis das citocinas TGF-β e IL-10 no meio condicionado de CTM-TA cultivadas em 2D e 3D após a indução de hipóxia química por Cloreto de Cobalto (CoCl2). As CTM-TA foram cultivadas até atingirem a confluência de 80% e em seguida foram transferidas para placas de 24 poços, onde foram tratadas com meio indutor de hipóxia em cultivos realizados em 2D e 3D. A quantificação foi realizada utilizando os kits TGF-β1 e IL10 humanos. Nas análises foi utilizado o ensaio ELISA sanduíche. Os resultados mostraram
que a produção de citocinas IL10 e TGF-β aumentaram quando o cultivo celular foi tridimensional em condições de hipóxia, indicando que os fornecimentos de oxigênio associado ao cultivo em 3D influenciaram de maneira significativa na produção de tais citocinas. Esta pode ser uma estratégia potente e de baixo custo para aumentar a liberação TGF-β e IL10 no meio condicionado de CTM-TA.