Sais convencionais e voláteis como agentes de precipitação para proteína recombinante com ação antiviral
DOI:
https://doi.org/10.14393/BJ-v33n4a2017-36729Palavras-chave:
Measles, recAVLOEc, Salting out, Volatile saltResumo
Proteínas recombinantes expressas em culturas celulares têm se mostrado importantes na produção de fármacos de interesse para a saúde humana. Este estudo investigou a precipitação da proteína recAVLOEc, sintetizada por células de E. coli BL21 (DE3) pLysS, utilizadas como sistema de expressão da AVLO, proteína com atividade antiviral, originalmente encontrada na hemolinfa da lagarta Lonomia obliqua. A precipitação foi conduzida por meio do uso de sais convencionais (sulfato de amônio e de sódio) e do sal volátil carbamato de amônio. Inicialmente o precipitado proteico obtido do lisado bacteriano foi administrado em culturas de células L929 para avaliar o efeito citotóxico e posteriormente em células Vero infectadas com o vírus do sarampo, para a verificação da ação antiviral. Um efeito tóxico em culturas de L929 foi observado para os precipitados obtidos pelo uso de sulfato de amônio e de sódio. Testes em culturas de L929 infectadas com o vírus EMC foram também efetuados e as amostras de proteínas precipitadas com os sais convencionais e o sal volátil não resultaram em ação antiviral. Em culturas de células Vero, o uso do sulfato e sódio como agente de precipitação das proteínas contidas no lisado bacteriano resultou em ação antiviral para o sarampo.
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Copyright (c) 2017 Kamilla Alves Carvalho, Dalton Giovanni Nogueira da Silva, Ronaldo Zucatelli Mendonça, Erika Ohta Watanabe, Fabiana Regina Xavier Batista
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