CARACTERIZAÇÃO QUaMICA, ENZIMaTICA e CITOTÓXICA DE UMA FOSFOLIPASE A2 aCIDA ISOLADA DA PEÇONHA DE Bothrops paulosensis.

Resumo

As fosfolipases A2 catalisam a hidrólise de fosfolipídeos, liberando como produtos ácidos graxos livres e lisofosfolipídeos. As fosfolipases das peçonhas de serpentes são amplamente estudadas devido à variedade de seus efeitos farmacológicos como neurotoxicidade, miotoxicidade, cardiotoxicidade, ativação ou inibição da agregação plaquetária, anticoagulação, edema, convulsão, hipotensão, hemorragia interna, dentre outras. Porém, nem todas as PLA2 induzem todos esses efeitos. Este trabalho teve como objetivo a purificação e caracterização química e enzimática de uma fosfolipase A2 ácida da peçonha de Bothrops pauloensis, bem como a avaliação de sua ação bacteriolítica e citotóxica sobre células tumorais K-562 (leucemia). A fosfolipase A2 isolada foi denominada de CM1b-F5. Esta enzima foi purificada por cromatografia de troca iônica em CM-Sepharose Fast Flow seguido por filtração em Sephadex G-75 e finalizando em Phenyl Sepharose CL-4B. CM1b-F5 apresentou uma massa molecular de 15.8KDa, atividade fosfolipásica de 289 U/mg e atividade hemolítica indireta. Não apresentou ação bactericida e baixa atividade citotóxica, no entanto outras linhagens celulares deverão ser utilizadas para uma análise mais criteriosa dessa ação. Novos estudos deverão ser realizados com a PLA2 ácida isolada da peçonha de Bothrops pauloensis com intuito de obter novos parâmetros estruturais e funcionais que poderão contribuir para a utilização das mesmas como modelo estrutural para a síntese de novos agentes terapêuticos.