CARACTERIZAÇÃO PARCIAL DE Mn-ATPase DE LARVA DE Pachymerus nucleorum

Resumo

Foi isolada, a partir de larvas de Pachymerus nucleorum, uma fração que apresentou alta atividade Mn-ATPásica. As larvas foram extraídas do coco do babaçu, lavadas, e dissecadas para retirada do seu aparelho digestivo. O restante do corpo foi colocado em tampão de extração (imidazol 50 mM pH 7,5, sacarose 250 mM, EDTA 1 mM, EGTA 1 mM, β-mercaptoetanol 2 mM, aprotinina 2 µg/ml e benzamidina 1mM) e homogeneizado em triturador elétrico. O material homogeneizado foi centrifugado a 15000xg durante 30 minutos a 4°C, obtendo-se o precipitado (P1) e o sobrenadante (S1). A fração P1 foi homogeneizada em tampão de ressuspensão (imidazol 20 mM pH 7,5, EDTA 0,2 Mm, β-mercaptoetanol 2 mM, e benzamidina 0,1 mM) contendo Triton X-10 0,2%, e centrifugado a 15000xg por 30 minutos a 4°C, e obteve-se as frações S2 e P2. A fração P2 foi ressuspendida em tampão de ressuspensão contendo pirofosfato de sódio 50 mM e centrifugada a 40000xg durante 40 minutos a 4°C. Foi obtido as frações S3 e P3, sendo que a fração P3 foi homogeneizada em tampão de ressuspensão. A fração P3 apresentou alta atividade ATPásica em presença de manganês. O presente artigo tem por objetivo comparar a atividade Mn2+-ATPásica com a atividade Ca2+-ATPásica, por meio das curvas dessas atividades. Pretende-se também verificar os efeitos na presença que magnésio, cobalto, cobre, zinco, lítio, cálcio, ferro, e bário produzem na atividade Mn2+-ATPásica. Palavras Chave: Atividade Mn2+-ATPásica, Atividade Ca2+-ATPásica, Pachymerus nucleorum