OBTENÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE CÉLULAS MULTIPOTENTES MESENQUIMAIS ESTROMAIS DE MEDULA ÓSSEA PARA ESTUDO DO POTENCIAL TERAPÊUTICO EM DOENÇAS CARDIOVASCULARES
Palavras-chave:
Células tronco, fibroblastos cardíacos, adipogênese, osteogêneseResumo
Células multipotentes mesenquimais estromais (MSC) de medula óssea são células com características de células tronco. O presente estudo visou o estabelecimento da cultura de MSC, de acordo com os critérios mínimos ditados pela Sociedade Internacional de Terapia Celular (ISCT), para futuros ensaios terapêuticos em doenças cardiovasculares. A cultura de MSC foi feita por meio da extração da medula óssea total a partir dos fêmures e tíbias de ratos Wistar. O conteúdo medular total foi plaqueado e mantido em meio DMEM com 10% de soro fetal bovino em estufa de CO2 (5%) a 37º C. Após a terceira passagem, as células foram submetidas aos protocolos de diferenciação em adipócito e osteócito por 28 dias. Culturas de fibroblastos cardíacos (FC) foram utilizadas como controle negativo da diferenciação. Após 28 dias de indução, observou-se vacúolos lipídicos e deposição de cálcio nas culturas de MSC, características sugestivas da diferenciação em adipócito e osteócito, respectivamente, enquanto que a cultura de FC não apresentou tal capacidade de diferenciação. O protocolo adotado mostra que a partir do plaqueamento de medula óssea total é possível identificar, dentro da população aderente estromal, células com capacidade de diferenciação em adipócitos e osteócitos, características atribuídas à MSC e que estão de acordo com os critérios mínimos ditados pela ISCT.
